2024-11-09 02:06:49
常见的有组织病理染色、WesternBlot、PCR等),实验仪器是否需要预约使用。如果需要外送生物公司检测,需要提前联系好商家,以及了解清楚样本如何获取,如何运输。饲养动物及干预动物购买后需要将时间节点提前规划好,比如,周需要做什么?测量体重?观察饮食?测量需要的指标?中间有无特殊操作?比如灌胃、测量体重、做CT检测、取血?……第几周取材?取材需要哪些组织?预实验方案就要提前设计清楚以上内容。取材及样品准备取材需要提前到动物房禁食、称体重、取出动物、手术器械的消毒、组织固定所需要的试剂和EP管,WesternBlot和PCR所需要的样本储存条件。比如冻存管、EP管,是否需要冰块?是否需要液氮?取材当天需要多少人?是否需要请人帮忙?如果所需要取出的样本较多,建议大家请人一起帮忙,流水线作业,这样能节省时间,并且能保证样品的质量。如果请人,每个人需要负责哪一板块的工作,比如谁负责麻醉,谁负责取血液,谁负责取,谁负责拍照、谁负责储存,都需要提前规划交代清楚。实验指标检测如果是需要自己做的检测,比如常见的WesternBlot、PCR,建议提前可以看看教程(无论是视频还是贴吧,都要自己多方参考)。有了一定的理论基础后。由于卵巢早衰的病因多种多样,如自身免疫功能异常、遗传因素、代谢因素、化疗、放疗及等。上海兔动物模型实验
SD大鼠脑缺血致脑梗死模型【材料】水合氯醛、线栓直径(体重250-300g)【方法】1、10%水合氯醛(35mg/kg)腹腔注射麻醉。2、仰卧位固定,颈正中线切口,分离肌肉和筋膜,分离左侧颈总动脉(CCA)、颈外动脉(ECA)和颈内动脉(ICA)。3、微动脉夹暂时夹闭颈内动脉(ICA),活扣结扎近心端颈总动脉(CCA)、颈外动脉(ECA)打双结,在双结中间剪开小口插入线栓。4、将拴线插入到颈内动脉(ICA),用眼科镊轻推拴线,以颈外动脉(ECA)和颈内动脉(ICA)分叉处为参考位置。5、栓线插入预刻深度,感到有阻力,说明栓线已到达脑中动脉(MCA),打结固定栓线。6、血管外的栓线不要留得过长,1h后拔出栓线,缝合伤口,单笼饲养观察。注:前两三天老鼠会萎靡,不进食,注意不要,老鼠无死亡即可。上海实验动物模型放血致失血性贫血小鼠模型。
e:不同光强下gm20541基因敲除小鼠的暗适应视网膜电图b波统计;scotopicamplitude:暗光测定峰值;flashintensity:闪光强度;a-wave:a波;b-wave:b波。图6:光适应视网膜电图(erg)检测结果;图中:a-b:不同光强下gm20541基因敲除小鼠的光适应视网膜电图轨迹图;c:20cd·s/m2光强下gm20541基因敲除小鼠的光适应闪烁(flicker)视网膜电图轨迹图;d:不同光强下gm20541基因敲除小鼠的光适应视网膜电图a波统计;e:不同光强下gm20541基因敲除小鼠的光适应视网膜电图b波统计;f:20cd·s/m2光强下gm20541基因敲除小鼠的光适应闪烁(flicker)视网膜电图统计。sixko或cko表示gm20541基因敲除纯合子小鼠;ctr是指野生型;het是指杂合子。图7:视网膜前体细胞特异敲除gm20541基因小鼠视网膜切片免疫组化染色结果;小鼠年龄:4个月;os:outer-segment(外节);is:inner-segment(内节);onl:outernuclearlayer(外核层);inl:innernuclearlayer(内核层);图中:a:视网膜前体细胞特异敲除gm20541基因小鼠视网膜石蜡切片的h&e染色结果,外核层及内核层均变薄;b:对不同部位的gm20541敲除鼠视网膜外核层厚度统计。图8:视网膜前体细胞特异敲除gm20541基因小鼠ihc染色结果。
酒精性肝病(AH)大鼠模型建模方法【方法】1、正常组大鼠自由饮水。2、酒精性脂肪肝(alcoholicfattyliverdisease,AFL)模型组大鼠自由饮用酒精饮料,其酒精浓度从5%开始,每个浓度维持一周,依次改为10%、15%、20%、25%、30%、35%至40%,以40%浓度持续至12周。3、在实验过程中,各组大鼠均给以普通颗粒饲料,共持续为12周。4、第12,动物禁食12h,称重,下腔静脉取血处死,血液离心取上清备用。【检测】1、生化指标检测检测ALT、AST、TC、TG、FFA、LDL-C、HDL-C和血糖的含量。2、组织病理学酒精性脂肪肝模型组大鼠肝脏体积增大,明显肿胀,包膜紧张,边缘圆钝,呈奶黄色,切面油腻,腹腔内尤以有腹膜后脂肪堆积明显。HE染色显示,正常组肝脏内无明显脂肪变性,肝小叶结构正常,肝细胞索围绕静脉呈放射排列。模型组肝脏弥漫大量脂肪变性,细胞体积增大,呈气球样变。3、标志因子水平ELISA法测定血清中TNF-α和ApoB的含量。动物模型的优越性主要表现在以下几下方面。
视网膜外网层及其他相关细胞层出现相应病理改变。因此,视网膜前体细胞中的gm20541基因被敲除的动物可以作为视网膜色素变性疾病模型,用于视网膜色素变性性疾病研究等领域中,为该疾病的研究例如发病过程、机制以及相关药物的筛选提供一种新的模型。进一步地,在本发明的一些实施方案中,敲除gm20541基因序列是指敲除gm20541基因的外显子序列。敲除gm20541基因序列可以是敲除gm20541基因全长序列,也可以是敲除gm20541基因部分序列例如部分外显子序列,无论敲除那种类型(部分或全长)的序列,只要是能够在前体细胞中沉默gm20541基因的表达,使动物表现出视网膜色素变性性疾病相应特征即落入本发明的保护范围。进一步地,在本发明的一些实施方案中,所述外显子序列选自第1外显子、第2外显子、第3外显子中的任意一个或多个外显子序列。在本发明公开的内容基础上,即在本发明揭示了gm20541基因与视网膜色素变性疾病的相关关系的前提下,本领域技术人员容易想到敲除gm20541基因的任意一个或多个外显子序列,以使gm20541基因的功能受损,进而得到类似的视网膜色素变性疾病模型,此类方法,也是属于本发明的保护范围。进一步地,在本发明的一些实施方案中。可提供专业的大鼠小鼠动物疾病模型技术,包含心血管系统神经系统、呼吸系统、生殖、泌尿系统、成瘤系统等。上海兔动物模型实验
胆管结扎诱导炎症性肝损伤和肝纤维化小鼠模型。上海兔动物模型实验
再向老师、师兄师姐学习经验和技术,如果实验平台的仪器需要提前预约,建议提前规划好使用的时间。反复总结寻找答案在整个预实验的过程中可能会出现很多问题。比如造模效果欠佳、灌胃操作不当、腹腔注射操作失误、物使用不当等引起动物死亡。每遇到问题都需要自己想办法解决,可以从导师、师兄师姐、文献、贴吧、视频教程等找到答案。比如笔者曾遇到同样的物给药,发现有的大鼠麻醉得很深,有的大鼠还活蹦乱跳,在反复尝试调整浓度,给药剂量,更换麻醉方式,后来才发现是动物体重秤的准度有问题,导致体重秤得不准。因此,需要自己反复琢磨到底是实验过程中哪一个环节出现问题,逐一排除。也要求在每一个实验步骤需要标准化,统一化,尽可能的排除干扰因素,这样方便在遇到问题快的找到答案。同时,建议每日总结,大到动物死亡原因分析,小到灌胃操作耗时多长时间。建议反复总结出每天实验的优缺点。做任何一个操作之前,建议提前脑海中反复模拟,准备好相关工具和试剂,避免临用之际缺少药的,影响实验操作节奏和个人心情。笔者曾经灌胃操作的时候发现药物竟然忘带了,只好重新回实验室准备,那真叫一个郁闷。仔细记录每日实验过程无论是硕士还是博士。上海兔动物模型实验